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Implementation of a Chemiluminescent Immunoassay for S. Aureus Protein A in a Cd Microfluidic Device

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2 streptococci, catalase positive; in addition, S. aureus and S. intermedius are coagulase positive (but all the others Streptococci are coagulase negative) (Cuong 2002). In presence of staphylococci infection, diagnosis by microscopic examination of blood is not useful because of the small number of bacteria, therefore isolation of the microorganism from the specimen or blood culture is required. If specimens are contaminated by other microorganisms, staphylococci-specific culture media can be used, as mannitol salt agar with 7.5% sodium chloride. Confirmation of S. aureus infections requires specific tests, such as detection of catalase and coagulase production, identification of deoxyribonuclease, or the agglutination by the binding of immunoglobulin G and fibrinogen with protein A and the clumping factor. Detection of S.aureus by phage-typing with a phenotypic marker is also possible, even with with a poor reproducibility. S. aureus expresses several cell surface-associated and extracellular proteins, which include surface proteins able to bind to host protein such as laminin and fibronectin (which are present on epithelial and endothelial surface and are a component of blood clots) and a fibrinogen/fibrin binding protein. The importance of these matrix-binding proteins as virulence factors has been shown by studying defective mutants: mutants defective in binding to fibronectin and to fibrinogen have reduced virulence in a rat model for endocarditis. Staphylococci, and in particular S. aureus, produces many factors that interfere with host defence mechanisms. The major factor is a surface polysaccharide of either serotype 5 or 8, which is called microcapsule due to its appearance at microscopy observation and seems to have the function of impede bacteria phagocytosis. Another factor is the protein A, a surface protein which binds the Fc region of immunoglobulin G, also impeding phagocytosis (indeed, S. aureus mutants lacking protein A are efficiently phagocytised). In addition, S. aureus produces leukocidin, a toxin that acts on polymorphonuclear leukocytes. S. aureus also produces several proteic toxins that are responsible for symptoms in the infections.  α – toxin. The monomer binds to the membrane of susceptible cells reacting with membrane lipids. After oligomeration of toxin subunits a pore is formed through the membrane, allowing transit of monovalent (at low concentrations of bound α – toxin) or
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Informazioni tesi

  Autore: Deborah Sebastianelli
  Tipo: Laurea liv.II (specialistica)
  Anno: 2010-11
  Università: Università degli Studi di Bologna
  Facoltà: Farmacia
  Corso: Chimica e tecnologia farmaceutiche
  Relatore: Aldo Roda
  Lingua: Inglese
  Num. pagine: 53

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Parole chiave

elisa
microfluidica
chemiluminescenza
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