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Subproteomi delle membrane mitocondriali di muscolo cardiaco bovino: nuove metodologie di isolamento

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Indice Introduzione Pag. 1 Capitolo 1: Mitocondri e proteine di membrana. 1.1 I Mitocondri. Pag. 3 1.2 Proteine di trasporto mitocondriali. Pag. 7 1.3 Trasporto a livello della membrana mitocondriale esterna. Pag. 8 1.4 Trasporto a livello della membrana. mitocondriale interna. Pag. 11 1.4.1 Carrier ADP/ATP. Pag. 14 1.4.2 Carrier del 2-Chetoglutarato. Pag. 18 Capitolo 2: Approccio Proteomico nella caratterizzazione delle Proteine di membrana. 2.1 Proteine di membrana e Proteomica. Pag. 22 2.2 Proteoma e Proteomica. Pag. 25 2.3 Approccio proteomico. Pag. 30 Capitolo 3 : Subproteomi delle membrane mitocondriali di muscolo cardiaco bovino: nuove metodologie di isolamento. Risultati e discussione. Pag. 37 Capitolo 4: Materiali e Metodi. 4.1 Omogeneizzazione del tessuto muscolare cardiaco bovino. Pag. 56 4.2 Estrazione della frazione mitocondriale e microsomiale. Pag. 57 4.3 Quantificazione dell’espressione proteica con il metodo BIO-RAD. Pag. 58 4.4 Delipificazione delle proteine. Pag. 59 4.5 Preparazione del gel di poliacrilamide. Pag. 59 4.6 Colorazione con Coomassie Brillant Blue. Pag. 60 4.7 Immunoblot su nitrocellulosa (Western Blot). Pag. 61 4.8 Solubilizzazione della frazione mitocondriale. Pag. 62 4.9 Purificazione della frazione mitocondriale. Pag. 63 4.10 Preparazione delle colonne HTP e Celite. Pag. 64 4.11 Dialisi. Pag. 64 4.12 Ricostituzione. Pag. 65 4.13 Preparazione dei liposomi. Pag. 66 4.14 Preparazione delle colonne di Amberlite. Pag. 67 4.15 Preparazione delle colonne di Sephadex G-75. Pag. 68 4.16 Preparazione delle colonne Pierce. Pag. 68 4.17 Determinazione della radioattività entrata nei liposomi e calcolo dell’attività di trasporto. Pag. 68 4.18 Determinazione della concentrazione proteica con il metodo di Lowry. Pag. 69 4.19 Digestione degli Spots in Tripsina. Pag. 69 4.20 Hard Extraction. Pag. 71 Bibliografia Pag. 73
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Informazioni tesi

  Autore: Simona Parrotta
  Tipo: Laurea liv.II (specialistica)
  Anno: 2010-11
  Università: Università degli Studi della Calabria
  Facoltà: Farmacia
  Corso: Chimica e tecnologia farmaceutiche
  Relatore: Rosita Curcio
  Lingua: Italiano
  Num. pagine: 83

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Parole chiave

bovini
mitocondri
proteine di membrana
membrana mitocondriale
approccio proteomico
proteoma
subproteomi

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