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Analisi tramite microarray degli effetti della sovraespressione del gene clusterina sulla trascrizione genica in linee cellulari prostatiche immortalizzate e tumorali

Informazioni tesi

  Autore: Simona De Summa
  Tipo: Laurea liv.II (specialistica)
  Anno: 2007-08
  Università: Università degli Studi di Parma
  Facoltà: Scienze Matematiche, Fisiche e Naturali
  Corso: Biologia
  Relatore: Roberto Perris
  Lingua: Italiano
  Num. pagine: 81

La clusterina (clu) ha un ruolo controverso nel caricoma prostatico. La sua espressione è soppressa con il progredire della malattia. si è deciso allora di avvalerci di un'importante tecnica di analisi: il microarray. Questa tecnica in un singolo esperimento permette di analizzare le variazioni nella regolazione della trascrizione genica di un numero di geni molto grande. In tal modo ho posto a confronto le differenze nella trascrizione quando la clusterina è sovra-espressa stabilmente o in maniera transiente. i risultati sembrano dimostrare che nella prima condizione Clu svolga funzione anti-apoptotica, nella seconda, invece, pro-apoptotica.

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   1 Sommario La clusterina è una proteina eterodimerica sostanzialmente ubiquitaria all’interno dell’organismo. Il suo coinvolgimento in diversi processi pato-fisiologici è stato oggetto di numerosi studi. Nel nostro laboratorio, si svolgono studi riguardanti la funzione di CLU nel carcinoma prostatico, con particolare attenzione nel suo ruolo nel processo apoptotico. Questo interesse è dovuto alla scoperta che, in seguito a castrazione chirurgica nei ratti, si verifica un aumento della trascrizione del gene CLU. Il suo ruolo ancora oggi non è stato chiarito e il quadro è stato arricchito, e complicato, dalla scoperta di diverse forme di questa proteina con diversa localizzazione cellulare. In particolare, è stata riportata una forma nucleare che inibisce la crescita cellulare e la sopravvivenza con un meccanismo caspasi-dipendente. L’accumulo di nCLU è stato associato alla morte cellulare caratterizzata da distacco delle cellule (anoikis). Queste evidenze sono, però, in contrasto con altri studi che ipotizzano un ruolo anti-apoptotico di CLU. Ad esempio, un altro studio condotto su cellule androgeno-dipendenti LNCaP ha messo in evidenza che le cellule che esprimono CLU full-lenght sono resistenti all’apoptosi indotta da TNF-α. Alla luce di questi dati, nella tumorigenesi, un processo che porta a una mancata regolazione dei processi di morte programmata e del ciclo cellulare, appare chiaro che si verifica un cambiamento nell’espressione genica di questa proteina. È stato chiaramente dimostrato che il livello di espressione di CLU influisce anche sull’avanzamento del ciclo cellulare poichè l’over-espressione di CLU blocca cellule immortalizzate con SV-40 PNT2 e PNT1A nella fase G 0 /G 1 . Inoltre, è stato visto, che in linee cellulari tumorali trasfettate in modo da sovra-esprimere CLU full-

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Parole chiave

cloni stabili
clusterina
microarray
pathway
prostata
segnalazione
trasfezione
tumore
western blot

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