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Stress cardiovascolare: modulazione della proteina BAG3

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I INDICE INDICE I ABSTRACT V 1. INTRODUZIONE pag. 1 1.1 Cardiomiociti 1 1.2 Cellule endoteliali 4 1.3 La famiglia “BAG” 7 1.3.1 Il gene bag3 8 1.3.1.1 Regolazione della trascrizione del gene bag3 10 1.3.2 La proteina BAG3 12 1.3.3 Ruolo di BAG3 nell’apoptosi 15 1.3.4 Importanza del PQC (“Protein Quality Control”) 16 1.3.4.1 sHsp 17 1.3.4.2 Interazione tra BAG3 e HspB8 18 1.3.5 Macroautofagia : BAG3 mette in campo il suo ruolo di co-chaperone 19 1.3.5.1 Induzione del pathway dell’eIF2α chinasi 22 II 1.3.6 CCT : partner che crea una connessione tra BAG3 e l’actina 23 1.4 BAG3 e le caratteristiche strutturali dei cardiomiociti 23 1.4.1 Influenza di BAG3 sull’organizzazione miofibrillare nei cardiomiociti 23 1.4.2 Mutazione di BAG3 e miopatie miofibrillari 28 1.4.3 Cardiomiopatie e BAG3 31 1.4.3.1 Cardiomiopatia di Tako-Tsubo 32 1.5 Adrenalina 34 1.5.1 Adrenalina e cardiomiociti 35 1.5.1.1 Adrenalina, Ca 2+ e apoptosi 37 1.5.2 Cellule endoteliali e catecolamine 39 1.6 Caffeina 39 1.6.1 La caffeina come induttore di attività contrattile muscolare 40 1.6.2 Caffeina, Ca 2+ e apoptosi nei cardiomiociti 41 2. MATERIALI E METODI 43 2.1 Linee cellulari 43 2.2 Crescita di linee cellulari eucariotiche in monolayer 45 2.3 Vitalità cellulare 45 2.4 Trasfezione 45 2.5 Lisi cellulare ed estrazione proteica 46 III 2.6 Determinazione della concentrazione proteica totale: saggio di Bradford 47 2.7 Elettroforesi su gel di poliacrilammide con sodio dodecilsolfato (SDS-PAGE) 47 2.8 Western blotting 48 2.8.1 Anticorpi usati nel Western blot 49 2.9 Immunofluorescenza indiretta ed analisi per microscopia confocale 49 2.10 Analisi dei livelli di Ca 2+ libero mediante citofluorimetria a flusso 50 2.11 Analisi statistica dei dati 51 3. SCOPO DELLA TESI 52 4. RISULTATI 53 4.1 Polimorfismi di BAG3 nella patogenesi della cardiomiopatia di Tako-Tsubo 53 4.2 Trattamenti con adrenalina e caffeina modulano l’espressione di BAG3 56 4.3 Esperimenti di immunofluorescenza indiretta evidenziano alterazioni strutturali associate ai trattamenti 61 4.4 Risposta ai trattamenti in cellule trasfettate con siRNA di bag3 e modulazione del rilascio di Ca 2+ 66 5. CONCLUSIONI 73 6. BIBLIOGRAFIA 76
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Stress cardiovascolare: modulazione della proteina BAG3

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Informazioni tesi

  Autore: Rita Manzo
  Tipo: Tesi di Laurea
  Anno: 2012-13
  Università: Università degli Studi di Salerno
  Facoltà: Farmacia
  Corso: Chimica e Tecnologia Farmaceutiche
  Relatore: Maria Pascale
  Lingua: Italiano
  Num. pagine: 88

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Parole chiave

proteine
bag3
stress cardiovascolare

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