Effetto di due diversi trattamenti farmacologici sull'alterazione della vescica in un modello animale di Sindrome Metabolica

INDICE 
 
1 - INTRODUZIONE                                                                                                       1  
1.1. SINDROME METABOLICA                                                                                     1                                                                    
  1.1.1. Criteri per l’identificazione della Sindrome Metabolica                                 3 
1.2. SINTOMI DEL BASSO TRATTO URINARIO (LUTS)                                          6 
1.3. LA SPERIMENTAZIONE ANIMALE                                                                   14 
1.3.1. Finalità della sperimentazione animale                                                             16 
1.3.2. Animali utilizzabili                                                                                               16 
1.3.3. La scelta del modello animale                                                                             17 
1.3.4. Stabulario dell’Università degli Studi di Firenze                                             19 
1.3.5. Modello animale di Sindrome Metabolica                                                        19 
1.4. RECETTORE FXR                                                                                                     21 
1.4.1. Agonista selettivo del recettore FXR: INT-747                                                  25 
2 - SCOPO DELLA TESI                                                                                               27 
3 - MATERIALI E METODI                                                                                         28 
3.1. Farmaci e sostanze chimiche                                                                                  28 
3.2. Modello animale di coniglio HFD                                                                         28 
3.3. Misure del colesterolo, dei trigliceridi, della glicemia e ormoni  
       steroidei nel plasma sanguigno                                                                              30                                                                                         
3.4. Studi di contrattilità in vitro                                                                                    31 
3.5. Testi di tolleranza al glucosio per via orale                                                          32 
3.6. Preparazione di membrane e frazioni citosoliche e Western Blot  
       per i saggi di attivazione di RhoA                                                                         32 
3.7. Estrazione dell’RNA e analisi quantitativa RT-PCR                                           33 
3.8. Colorazione tricromica di Masson                                                                         33 
3.9. Rilevamento dell’ipossia e immunoistochimica                                                  34 
3.10. Colture cellulari muscolari di vescica di coniglio e saggio 
         di migrazione cellulare                                                                                          35 
3.11. Analisi statistiche                                                                                                    36

4 - RISULTATI                                                                                                               37 
4.1. Effetti del trattamento con HFD-indotta e caratteristiche  
        della Sindrome Metabolica                                                                                    37 
4.2. Espressione di FXR e AR nella vescica di coniglio                                              39 
4.3. Effetti della HFD e studio di contrattilità della vescica                                      40 
4.4. Effetto della HFD e dei vari trattamenti sulle caratteristiche  
        morfologiche della vescica                                                                                     42 
4.5. Effetti in vitro dell’attivazione di FXR nelle cellule del muscolo 
        liscio della vescica                                                                                                   44 
5 - CONCLUSIONI                                                                                                        46 
6 - GRAFICI E IMMAGINI                                                                                          51 
7 - BIBLIOGRAFIA                                                                                                        64